服务简介

泛素是一种含76个氨基酸的多肽,其中包含7个赖氨酸残基(K),其C端可与底物的赖氨酸形成异肽键,引起底物泛素化。泛素的K11,K29,K48和K63菌能参与形成泛素与泛素之间的异肽键。泛素存在于除真细菌界和古细菌界外的许多不同组织和器官中,进化上非常保守,具有标记待降解蛋白的功能。

由泛素控制的蛋白质降解具有重要的生理意义,不仅可以清楚错误的蛋白质,还对细胞周期调控、DNA修复、细胞生长、免疫功能等都有调控作用。

ubiquitylation

服务内容

蛋白质泛素化位点检测

原理

泛素化蛋白经胰酶消化后,在包含泛素化的赖氨酸会保留有二甘氨酸标签,利用二甘氨酸(diGG)抗体可特异性地富集肽样品中泛素化修饰肽片段,并对富集后的泛素化肽进行液相色谱-串联质谱检测。

ubiquitylation3
ubiquitylation1

应用领域

蛋白质降解、免疫反应、信号转导、DNA修复、细胞周期、疾病标志物筛选、疾病控制机制

实验路线

ubiquitylation-process

实验仪器

Q-Exactive, Q-Exactive HF, Orbitrap Fusion, Orbitrap Fusion Lumos

送样要求

样品类型送样要求
常规动物组织80mg
坚硬动物组织600mg
动物毛发80mg
常规植物组织1g
木本植物的树根、树皮、树枝等20g
果实种子2g
花粉300mg
微生物50mg
动物细胞1×10^8
血清、血浆0.5ml
乳汁5ml
脑脊液、关节液和淋巴液0.2ml
唾液0.5ml
泪液1ml
尿液100ml
分泌蛋白40ml
* 注意:
1.膜蛋白项目,针对哺乳动物的细胞或组织,邦菲生物采用的是Thermo公司的试剂盒提取。细胞量至少5×106
2.细胞样品的收集方法,邦菲生物推荐使用胰酶消化的方法收集,如果客户对用细胞刮的方法很有经验,注意需在细胞裂解液保护的条件下刮细胞。
3.动物组织样品,务必注意漂洗干净,尤其是血。
4.细胞样品注意漂洗干净,尤其血清培养基培养的细胞,白蛋白残留会影响鉴定结果。
5.细胞样品常规情况下,客户收集好细胞样品送样即可。如果客户收细胞时要加入裂解液,请务必提前与邦菲销售或者技术沟通。

参考文献

[1] Xu G, Paige J S, Jaffrey S R. Global analysis of lysine ubiquitination by ubiquitin remnant immunoaffinity profiling. Nature biotechnology, 2010, 28(8): 868-873.

[2] Vertegaal A C O. Uncovering ubiquitin and ubiquitin-like signaling networks. Chemical Reviews, 2011, 111(12): 7923-7940.

[3] Sylvestersen K B, Young C, Nielsen M L. Advances in characterizing ubiquitylation sites by mass spectrometry. Current opinion in chemical biology, 2013, 17(1): 49-58.

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服务简介

泛素是一种含76个氨基酸的多肽,其中包含7个赖氨酸残基(K),其C端可与底物的赖氨酸形成异肽键,引起底物泛素化。泛素的K11,K29,K48和K63菌能参与形成泛素与泛素之间的异肽键。泛素存在于除真细菌界和古细菌界外的许多不同组织和器官中,进化上非常保守,具有标记待降解蛋白的功能。

由泛素控制的蛋白质降解具有重要的生理意义,不仅可以清楚错误的蛋白质,还对细胞周期调控、DNA修复、细胞生长、免疫功能等都有调控作用。

ubiquitylation

服务内容

蛋白质泛素化位点检测

原理

泛素化蛋白经胰酶消化后,在包含泛素化的赖氨酸会保留有二甘氨酸标签,利用二甘氨酸(diGG)抗体可特异性地富集肽样品中泛素化修饰肽片段,并对富集后的泛素化肽进行液相色谱-串联质谱检测。

ubiquitylation3
ubiquitylation1

应用领域

蛋白质降解、免疫反应、信号转导、DNA修复、细胞周期、疾病标志物筛选、疾病控制机制

+ 技术参数

实验路线

ubiquitylation-process

实验仪器

Q-Exactive, Q-Exactive HF, Orbitrap Fusion, Orbitrap Fusion Lumos

送样要求

样品类型送样要求
常规动物组织80mg
坚硬动物组织600mg
动物毛发80mg
常规植物组织1g
木本植物的树根、树皮、树枝等20g
果实种子2g
花粉300mg
微生物50mg
动物细胞1×10^8
血清、血浆0.5ml
乳汁5ml
脑脊液、关节液和淋巴液0.2ml
唾液0.5ml
泪液1ml
尿液100ml
分泌蛋白40ml
* 注意:
1.膜蛋白项目,针对哺乳动物的细胞或组织,邦菲生物采用的是Thermo公司的试剂盒提取。细胞量至少5×106
2.细胞样品的收集方法,邦菲生物推荐使用胰酶消化的方法收集,如果客户对用细胞刮的方法很有经验,注意需在细胞裂解液保护的条件下刮细胞。
3.动物组织样品,务必注意漂洗干净,尤其是血。
4.细胞样品注意漂洗干净,尤其血清培养基培养的细胞,白蛋白残留会影响鉴定结果。
5.细胞样品常规情况下,客户收集好细胞样品送样即可。如果客户收细胞时要加入裂解液,请务必提前与邦菲销售或者技术沟通。
+ 文献及案例

参考文献

[1] Xu G, Paige J S, Jaffrey S R. Global analysis of lysine ubiquitination by ubiquitin remnant immunoaffinity profiling. Nature biotechnology, 2010, 28(8): 868-873.

[2] Vertegaal A C O. Uncovering ubiquitin and ubiquitin-like signaling networks. Chemical Reviews, 2011, 111(12): 7923-7940.

[3] Sylvestersen K B, Young C, Nielsen M L. Advances in characterizing ubiquitylation sites by mass spectrometry. Current opinion in chemical biology, 2013, 17(1): 49-58.

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