描述
产品编号
BP0601-50
BP0601-100
产品介绍
北京邦菲生物科技有限公司生产的细菌总蛋白提取试剂适用于革兰氏阴性菌总蛋白的提取。分离得到的蛋白样品可应用于SDS-PAGE、Western blot、蛋白质组学等分析。使用Bradford蛋白定量试剂盒测定蛋白浓度。
本试剂盒可提取10 g （50mL）- 20 g（100 mL）菌体组织样品。
未提供的设备或材料
- 涡旋混合仪
- 移液器
- 离心机和离心管
- 蛋白定量试剂盒
注意事项
- 如需加入蛋白酶抑制剂，可在裂解液使用前数分钟内加入。
- 为防止蛋白降解，所有操作均需在4℃或冰上进行。
- 本提取试剂中的提取试剂具有一定的刺激性，一旦接触请立即用水冲洗。
- 为了您的安全和健康，操作过程中请穿实验服并戴一次性手套。
- 推荐使用Bradford蛋白定量试剂盒进行蛋白定量。
使用步骤
1、4℃，5000g离心3-5 分钟，收集菌体样品。
2、弃上清，预冷PBS漂洗菌体1-2次。4℃，5000g离心3分钟，弃上清。
3、加入适量裂解液，涡旋震荡30 秒，间隔30秒，重复5次。
注意：1）按照每100 mg菌体样本加入0.5 mL裂解液的比例加入裂解液。
2）裂解液在使用前数分钟，加入蛋白酶抑制剂。
3）如果裂解不充分，可适当调整增加裂解液的用量。
4）如果需要获得高浓度的蛋白样品，可适当减少裂解液的用量。
4、4℃旋转混匀10分钟。
5、4℃，15000g离心10分钟，收集上清液即为蛋白溶液，-80℃保存或进行下一步分析。
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