植物蛋白提取试剂盒(质谱级)100次

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北京邦菲生物科技有限公司生产的植物总蛋白提取试剂盒适用于各种类型的植物组织总蛋白的提取,分离得到的蛋白可应用于Western blot、SDS-PAGE、亲和纯化,2D电泳、蛋白质组等实验。本产品已经用拟南芥、大豆、水稻、番茄、葡萄、棉花、黄瓜、火龙果等植物的不同部位(叶片、花、种子和根部)进行过实验,方法有效。

分类: 编号: PP0601-100 标签:

描述

产品编号

PP0601-100

产品介绍

北京邦菲生物科技有限公司生产的植物总蛋白提取试剂盒适用于各种类型的植物组织总蛋白的提取,分离得到的蛋白可应用于Western blot、SDS-PAGE、亲和纯化,2D电泳、蛋白质组等实验。本产品已经用拟南芥、大豆、水稻、番茄、葡萄、棉花、黄瓜、火龙果等植物的不同部位(叶片、花、种子和根部)进行过实验,方法有效。

试剂盒组成

成分 规格 保存条件
PE solution A 100 mL 2-8℃
PE solution B 100 mL 2-8℃
PE solution C 200 mL -20℃
PE solution D 30 mL 2-8℃

未提供的设备或材料

  1. 涡旋混合仪
  2. 移液器
  3. 离心机和离心管
  4. 液氮和研钵
  5. 试剂:丙酮

注意事项

  1. 需自备蛋白酶抑制剂,裂解液使用前数分钟内加入。
  2. 本产品低温储存期间如有沉淀析出,涡旋混匀溶解后可正常使用。
  3. 为防止蛋白降解,所有操作均需在4℃或冰上进行。
  4. 如需蛋白定量,建议使用Bradford方法。
  5. 本提取试剂中的提取试剂具有一定的刺激性,一旦接触请立即用水冲洗。
  6. 为了您的安全和健康,操作过程中请穿实验服并戴一次性手套。

使用步骤

  1. 称取植物组织样品,液氮条件下研磨成粉末后转入5 mL 离心管中,加入PE Solution A,涡旋混匀。

注意:(1)PE Solution A为悬浊液,颠倒混匀后正常使用。

(2)按照每1 g植物组织加入4 mL的比例加入 PE Solution A。

  1. 加入等体积的PE Solution B,涡旋混匀10 s,冰上静置10 s,重复5次。

注意:1)PE Solution B为分层溶液,使用前切勿扰动。若误将其扰动,置于4℃放置30 min待其分层后使用。

2)吸取PE Solution B时,注意吸取下层溶液。

  1. 4℃,静置30 min。
  2. 4℃,15,000 g,离心15 min。
  3. 取上清液,加入5倍体积的PE Solution C,-20℃沉淀过夜。
  4. 4℃,15,000g,离心15 min,弃上清。
  5. 沉淀中加入2 mL预冷丙酮,用枪轻轻吹打,重悬沉淀。
  6. 4℃,12,000rpm,离心5 min,收集沉淀。
  7. 重复第7-8步。
  8. 沉淀物自然风干后加入适量PE Solution D。

注意:为防止蛋白降解,获得较优的实验结果,建议加入适量的蛋白酶抑制剂。

  1. 15,000 g,离心20 min,收集的上清即为蛋白溶液,-80℃保存或进行下一步分析。

 

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