服务简介

蛋白质在体内生理状态中大约有300多种翻译后修饰,磷酸化修饰是所有翻译后修饰中功能最为重要,作用最为广泛的,也是研究最为深入的蛋白翻译后修饰之一。

蛋白磷酸化和去磷酸化这一对可逆过程作为一种生物体重要的分子调节机制,参与了几乎所有的细胞生命活动的过程,包括细胞的生长增值,发育分化,凋亡坏死和信号传导等等;蛋白质发生异常磷酸化修饰有可能引起癌症,糖尿病,以及多种系统性免疫疾病。

服务内容

磷酸化蛋白鉴定,位点分析,磷酸化蛋白的相对定量分析。

原理

基于翻译后修饰蛋白质的不均一性及相对丰度低的特性,翻译后修饰蛋白质的研究主要是利用现有的蛋白质组学技术体系包括电泳、色谱、生物质谱以及生物信息学工具对修饰蛋白质或肽段进行富集分离,消除修饰引起的不均一性即质量标记修饰位点,使之与理论质量有一个差异,通过质谱检测这种差异,从而鉴定蛋白质,并通过串联质谱鉴定修饰位点。

应用领域

疾病(癌症,代谢性疾病,神经性疾病等等)、动植物生长发育、药物的分子机理、环境胁迫、干细胞研究、神经发育

技术优势

TiO2 富集方法富集效率高,操作快速,不需要特殊设备,能与多种缓冲盐体系兼容等优点。

实验路线

phosphoproteomic-process

实验仪器

Q-Exactive HF, Orbitrap Fusion

送样要求

样品类型送样要求
常规动物组织80mg
坚硬动物组织600mg
动物毛发80mg
常规植物组织1g
木本植物的树根、树皮、树枝等20g
果实种子2g
花粉300mg
微生物50mg
动物细胞1×10^8
血清、血浆0.5ml
乳汁5ml
脑脊液、关节液和淋巴液0.2ml
唾液0.5ml
泪液1ml
尿液100ml
分泌蛋白40ml
* 注意:
1.膜蛋白项目,针对哺乳动物的细胞或组织,邦菲生物采用的是Thermo公司的试剂盒提取。细胞量至少5×106
2.细胞样品的收集方法,邦菲生物推荐使用胰酶消化的方法收集,如果客户对用细胞刮的方法很有经验,注意需在细胞裂解液保护的条件下刮细胞。
3.动物组织样品,务必注意漂洗干净,尤其是血。
4.细胞样品注意漂洗干净,尤其血清培养基培养的细胞,白蛋白残留会影响鉴定结果。
5.细胞样品常规情况下,客户收集好细胞样品送样即可。如果客户收细胞时要加入裂解液,请务必提前与邦菲销售或者技术沟通。

参考文献

[1] Guo H, Garcia‐Vedrenne A E, Isserlin R, et al. Phosphoproteomic network analysis in the sea urchin Strongylocentrotus purpuratus reveals new candidates in egg activation. Proteomics, 2015, 15(23-24): 4080-4095.

[2] Qiu J, Hou Y, Tong X, et al. Quantitative phosphoproteomic analysis of early seed development in rice (Oryza sativa L.). Plant molecular biology, 2016, 90(3): 249-265.

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服务简介

蛋白质在体内生理状态中大约有300多种翻译后修饰,磷酸化修饰是所有翻译后修饰中功能最为重要,作用最为广泛的,也是研究最为深入的蛋白翻译后修饰之一。

蛋白磷酸化和去磷酸化这一对可逆过程作为一种生物体重要的分子调节机制,参与了几乎所有的细胞生命活动的过程,包括细胞的生长增值,发育分化,凋亡坏死和信号传导等等;蛋白质发生异常磷酸化修饰有可能引起癌症,糖尿病,以及多种系统性免疫疾病。

服务内容

磷酸化蛋白鉴定,位点分析,磷酸化蛋白的相对定量分析。

原理

基于翻译后修饰蛋白质的不均一性及相对丰度低的特性,翻译后修饰蛋白质的研究主要是利用现有的蛋白质组学技术体系包括电泳、色谱、生物质谱以及生物信息学工具对修饰蛋白质或肽段进行富集分离,消除修饰引起的不均一性即质量标记修饰位点,使之与理论质量有一个差异,通过质谱检测这种差异,从而鉴定蛋白质,并通过串联质谱鉴定修饰位点。

应用领域

疾病(癌症,代谢性疾病,神经性疾病等等)、动植物生长发育、药物的分子机理、环境胁迫、干细胞研究、神经发育

技术优势

TiO2 富集方法富集效率高,操作快速,不需要特殊设备,能与多种缓冲盐体系兼容等优点。

+ 技术参数

实验路线

phosphoproteomic-process

实验仪器

Q-Exactive HF, Orbitrap Fusion

送样要求

样品类型送样要求
常规动物组织80mg
坚硬动物组织600mg
动物毛发80mg
常规植物组织1g
木本植物的树根、树皮、树枝等20g
果实种子2g
花粉300mg
微生物50mg
动物细胞1×10^8
血清、血浆0.5ml
乳汁5ml
脑脊液、关节液和淋巴液0.2ml
唾液0.5ml
泪液1ml
尿液100ml
分泌蛋白40ml
* 注意:
1.膜蛋白项目,针对哺乳动物的细胞或组织,邦菲生物采用的是Thermo公司的试剂盒提取。细胞量至少5×106
2.细胞样品的收集方法,邦菲生物推荐使用胰酶消化的方法收集,如果客户对用细胞刮的方法很有经验,注意需在细胞裂解液保护的条件下刮细胞。
3.动物组织样品,务必注意漂洗干净,尤其是血。
4.细胞样品注意漂洗干净,尤其血清培养基培养的细胞,白蛋白残留会影响鉴定结果。
5.细胞样品常规情况下,客户收集好细胞样品送样即可。如果客户收细胞时要加入裂解液,请务必提前与邦菲销售或者技术沟通。
+ 文献及案例

参考文献

[1] Guo H, Garcia‐Vedrenne A E, Isserlin R, et al. Phosphoproteomic network analysis in the sea urchin Strongylocentrotus purpuratus reveals new candidates in egg activation. Proteomics, 2015, 15(23-24): 4080-4095.

[2] Qiu J, Hou Y, Tong X, et al. Quantitative phosphoproteomic analysis of early seed development in rice (Oryza sativa L.). Plant molecular biology, 2016, 90(3): 249-265.

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